細胞發生空泡怎么辦？

“細胞空泡化”在細胞培養中也是一個常見問題，它的出現原因有多種，不少客戶碰到往往會很頭疼.......

實際上有不少細胞本身就存在一定的空泡，如HepG2，Caco-2等細胞。除此之外，千舍生物給大家列舉出了可能出現這種情況的原因，方便大家進行分析選擇解決的方法：

問：可以引起細胞空泡化出現的原因有哪些？

答：1）細胞老化

原代細胞培養的過程中經常出現這樣的情況，是有些細胞處于終末分化狀態，不會再分裂，時間長了就會空泡化而死亡。

傳代細胞出現這種狀況比較少見，出現的原因一般都是因為細胞傳代次數過多，老化嚴重。

2）PH值

培養液的PH值與細胞正常所需PH值差別太大。

3）胰酶消化

胰酶消化時間過長，會導致細胞狀態受損，有時也會出現這種情況。除此之外，如果消化細胞吹打時力度過大，產生太多氣泡，長期存在也會出現這種現象。

4）自噬

5）細胞代謝

在細胞培養過程中，由于血清濃度不夠、藥物作用、外界刺激等情況下導致細胞代謝出現問題，內質網應激狀況下會出現細胞空泡化的情況。

6）污染

衣原體感染：一旦一些細胞出現空泡化，繼續培養，空泡范圍會擴大，即使傳代后也如此，出現這種情況，細胞基本無法挽救。后來檢測發現，此種細胞存在衣原體的感染。

支原體污染：支原體污染在不嚴重的時候細胞是沒有什么明顯癥狀的，而且也無法通過光學顯微鏡觀察到，只有在嚴重的時候會導致細胞狀態變差，出現細胞空泡化的現象，細胞膜上也會出現小黑點附著。

7）藥物誘導

一些特定的誘導劑處理，是細胞質空泡化的原因，一般是需要觀察細胞變化而對細胞進行的特殊處理。

問：遇到細胞空泡化我們應該如何解決？

答：1）如果是因為細胞老化的原因，可以通過復蘇代數靠前的細胞進行培養。

2）如果是培養液PH的問題，可以通過更換培養液調整到合適的PH值，再進行培養。

3）在傳代時，要選用合適濃度的胰酶和選取適當的消化時間進行消化，在操作時避免吹打太過用力出現太多氣泡。

4）要保證細胞培養所需的營養充足，可以通過增加血清濃度和在培養基中加入谷氨酰氨解決。

5）盡量使用質量好和渠道正規的胎牛血清，因為這樣的血清營養豐富且外源刺激因子少，可以有效的避免出現這類問題。

6）在細胞培養時要嚴格進行無菌操作，操作時要規范，避免污染。可以通過試劑盒檢測細胞是否污染，對于已經污染的細胞滅菌后直接處理，避免污染其他細胞。

   胞質空泡化可以是可逆的，也可以是不可逆的。可逆的胞質空泡化通常只是在暴露于誘導劑后能觀察到，這種胞質空泡化可以引起細胞狀態的改變或者細胞周期停滯。而不可逆的胞質空泡化會導致細胞死亡，許多自然或者人工合成的化合物以及被細菌或者病毒感染后均會出現不可逆的胞質空泡化，因此出現這種情況，細胞便不可再用于后續的實驗中。