細胞培養生長不好的原因及解決方法?
可能原因:
1、細胞本身的狀態 細胞傳代次數多,細胞老化; 細胞的接種量:接種量過低,細胞生長緩慢; 細胞傳代時間過晚:細胞中毒,影響傳代后的細胞生長; 胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細胞死亡;時間過短,細胞未完全分離而成團,細胞死亡; 細胞的凍存與復蘇:慢凍速融。
2、污染 支原體污染; 霉菌污染。
3、培養基或血清 更換血清或培養基之前未進行驗證; 選擇的培養基是否合適; 培養基配制是否準確無誤。
4、培養環境 CO2供應是否正常; 培養箱或搖床溫度控制是否正確。
解決方法: 根據以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案(如下) :
1、注意細胞的本身狀態:如傳代次數、接種量等;
2、避免產生污染(用正規、合法、可溯源的血清);
3、要用合適的血清或培養基,最好經過驗證;
4、注意實驗室的環境。