細胞名稱:HS68 人男性正常龜頭細胞

貨號：WS60110（STR鑒定）

規格：1×10?cells/T25培養瓶

細胞介紹

Hs68 是從天冬氨酸酰化酶缺乏的白人男性患者的包皮中分離出來的成纖維細胞,這是一個正常46，XY核型的人類細胞系，染色體眾數為46，多倍體率為3.6%，X、Y染色體均能清晰辨認。該細胞系的天冬氨酸酰化酶水平異常低（重復測定結果為 0.028 mU/mg 或更低）。記錄表明 Hs 68 的捐贈者看起來是正常的,但約翰遜博士指出，缺乏天冬氨酸酰化酶的人患有卡納萬病。卡納萬病是一種破壞性的常染色體隱性遺傳病，涉及神經系統的海綿狀變性。據約翰遜博士說，患病兒童的成纖維細胞的天冬氨酸酰化酶水平為 0.003 至 0.02 mU/mg；攜帶者的水平從 0.016 到 0.04 mU/mg 不等，而正常水平從 0.1 到 0.4 mU/mg 不等。有關天冬氨酸酰化酶和卡納萬病的更多信息，請參閱 R. Kaul 等人的文章。

一、細胞特性

1） 來源：人，包皮

2） 形態：成纖維細胞樣，貼壁生長

3） 含量：>1x10^6  細胞數

4） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途：僅供科研使用。 

二、運輸和保存 

干冰運輸及復蘇好存活細胞 

（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。 

（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。 

三、培養基及培養凍存條件準備 

1） 準備MEM（推薦WS-P-0012）培養基；優質胎牛血清，10%；雙抗，1%。

血清我們推薦FBS500-WP-002

注：具體培養方式以隨貨說明書為準！！！！

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

四、傳代方法

收到細胞后，在倒置鏡下(最好是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。

（一)如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶，吸出培養液，換 10ml新鮮培養液后繼續培養。

(二)如果細胞已長滿，即可進行傳代培養。具體步驟如下：

1. 棄去培養液，用PBS（不含鈣,鎂離子）洗1-2次。

2. 加0.7-1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，用力拍打瓶壁，期間每隔 5-10s放到顯微鏡下觀察，直至50-70%的細胞脫落后，加入2ml 以上完全培養基中止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加完全培養基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養瓶中。如果沒有特別說明，收到細胞后的第一次傳代一般是一傳二。

注：

1、觀察細胞最好在低倍鏡（4或5X物鏡)下進行，否則不能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態請在10X或20X物鏡下。

2、瓶中運輸培養基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養基，細胞凍存后,培養基中可不加任何抗生素。

3、有些細胞貼壁不牢，如發現貼壁細胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶內。

4、收到細胞后，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請及時與我們聯系。