價格:¥1200.00
類型:細胞系
品牌:WinSera
編號:WS60125
規格:1×10?cells/T25培養瓶
細胞名稱:Jurkat(clone E6-1)人T淋巴細胞白血病細胞
貨號:WS60125(STR鑒定)
規格:1×10?cells/T25培養瓶
細胞介紹
人白血病T淋巴細胞,Jurkat細胞由Schneider建立,來源于一個14歲的男孩的外周血。該克隆是 Jurkat-FHCRC細胞株的一個克隆(Jurkat的一個衍生株),經佛波酯(phorbol esters)和外源凝集素(lectins)或抗T3單克隆抗體(需要兩種物質共同誘導)誘導后可產生大量IL-2。
一、細胞特性
1) 來源:外周血 組織: 套細胞淋巴瘤
2) 形態:淋巴母細胞,懸浮生長
3) 含量:>1x10^6 細胞數
4) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5) 用途:僅供科研使用。
二、運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。
(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
三、培養基及培養凍存條件準備
1)準備 1640基礎培養基 87%
優質胎牛血清 10%
GlutaMAX-1谷氨酰胺 1%
Sodium Pyruvate丙酮酸鈉 1%
P/S青霉素-鏈霉素 1%
參考傳代周期:
不超過300萬細胞/ mL,建議將活細胞密度控制在10萬-100萬/ mL之間參考傳代密度:10萬活細胞/ mL,參考換液頻率:2-3天。
注意:
a)該細胞為懸浮細胞,根據培養經驗以及客戶的反饋,傳代時使用【半換液法】對細胞狀態有利,因此我庫建議您使用【半換液法】進行傳代。同時,您在收到細胞后,請不要通過離心的方式收集細胞,可以直接向培養瓶中添加等體積的新鮮培養液,然后將細胞吹打均勻后移入兩個新的T25培養瓶中繼續培養即可。
b)該細胞對血清質量較為敏感,建議您使用進口大品牌優質血清進行培養,
培養,傳代時請注意保持細胞密度在合適的范圍。
血清我們推薦FBS500-WP-002
注:具體培養方式以隨貨說明書為準!!!!
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
四、傳代方法
收到細胞后,在倒置鏡下(最好是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。
(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶,吸出培養液,換 10ml新鮮培養液后繼續培養。
(二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養。具體步驟如下:
1. 棄去培養液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加0.7-1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,用力拍打瓶壁,期間每隔 5-10s放到顯微鏡下觀察,直至50-70%的細胞脫落后,加入2ml 以上完全培養基中止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加完全培養基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養瓶中。如果沒有特別說明,收到細胞后的第一次傳代一般是一傳二。
注:
1、觀察細胞最好在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,否則不能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態請在10X或20X物鏡下。
2、瓶中運輸培養基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養基,細胞凍存后,培養基中可不加任何抗生素。
3、有些細胞貼壁不牢,如發現貼壁細胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內。
4、收到細胞后,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請及時與我們聯系。