細胞名稱:MV-4-11 人髓性單核細胞白血病細胞

貨號：WS60150（STR鑒定）

規格：1×10?cells/T25培養瓶

細胞介紹

MV-4-11細胞系由Rovera課題組建立，來源于一名患有人雙表型髓性單核細胞白血病（biphenotypic B myelomonocytic leukemia）的10歲男孩的外周血。Interleukin (IL)-3可以獨立地支持該細胞長期生長，使用10%FBS培養時則不需要額外添加IL-3。但是，在IL-3和生長因子Granulocyte/Macrophage Colony-Stimulating Factor （GM-CSF）均處于低濃度的情況下，IL-3會抑制MV-4-11細胞的增殖。

生長因子Granulocyte Colony Stimulating Factor（G-CSF）會協同GM-CSF促進MV-4-11細胞的增殖，而單獨的G-CSF會短暫刺激該細胞系。據文獻[PubMed: 3500218]報道，間接免疫熒光法檢測髓性單核細胞抗原CD15，超過96%的該細胞為陽性，40~96%為單核細胞抗原CD4陽性，4-11%為單核細胞抗原CD10陽性。

一、細胞特性

1） 來源：男性，10歲 外周血

2） 形態：成淋巴細胞狀，懸浮生長

3） 含量：>1x10^6  細胞數

4） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途：僅供科研使用。 

二、運輸和保存 

干冰運輸及復蘇好存活細胞 

（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。 

（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。 

三、培養基及培養凍存條件準備 

1） 準備IMDM（推薦WS-P-0008）培養基；優質胎牛血清，10%；雙抗1%。

備注：

a) 該細胞為懸浮細胞，傳代時使用【半換液法】對細胞狀態較為有利，因此我庫建議您使用【半換液法】進行傳代。如你收到的細胞為15ML離心管發貨的細胞，請不要通過離心的方式收集細胞，可以直接向培養瓶中添加等體積的新鮮培養液，然后將細胞吹打均勻后移入兩個新的T25培養瓶中繼續培養即可。如你收到的細胞為T25培養瓶發貨的細胞，通過離心收集細胞后，添加8-10ml按照要求配置的新鮮培養液然后將細胞吹打均勻后移入兩個新的T25培養瓶中繼續培養即可。

后續建議您使用【半換液法】進行傳代。

b) 細胞對血清質量較為敏感，我庫建議您使用進口大品牌優質血清進行培養。

c) 該細胞對細胞密度較為敏感，培養、傳代時請注意保持細胞密度在合適的范圍。細胞接種密度20萬個/mL ，培養時維持細胞密度在10萬-100萬個/mL。

血清我們推薦FBS500-WP-002

注：具體培養方式以隨貨說明書為準！！！！

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

四、傳代方法

收到細胞后，在倒置鏡下(最好是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。

（一)如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶，吸出培養液，換 10ml新鮮培養液后繼續培養。

(二)如果細胞已長滿，即可進行傳代培養。具體步驟如下：

1. 棄去培養液，用PBS（不含鈣,鎂離子）洗1-2次。

2. 加0.7-1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，用力拍打瓶壁，期間每隔 5-10s放到顯微鏡下觀察，直至50-70%的細胞脫落后，加入2ml 以上完全培養基中止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加完全培養基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養瓶中。如果沒有特別說明，收到細胞后的第一次傳代一般是一傳二。

注：

1、觀察細胞最好在低倍鏡（4或5X物鏡)下進行，否則不能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態請在10X或20X物鏡下。

2、瓶中運輸培養基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養基，細胞凍存后,培養基中可不加任何抗生素。

3、有些細胞貼壁不牢，如發現貼壁細胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶內。

4、收到細胞后，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請及時與我們聯系。