細(xì)胞名稱(chēng):SU-DHL-6 人B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞

貨號(hào)：WS60185（STR鑒定）

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

細(xì)胞介紹

SU-DHL-6 是一種淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞，分離自一名 43 歲白人男性大細(xì)胞淋巴瘤患者的腹膜積液。所有 DHL 細(xì)胞系均未檢測(cè)到 Epstein-Barr 病毒 (EBV) 基因組。SU-DHL-6 具有 at(14;18)(q32;q21) 易位，并在其重鏈基因位點(diǎn)內(nèi)表現(xiàn)出意外的重組，這可能是染色體間斷裂點(diǎn)。在 SU-DHL-6 中，t(14;18) 易位將截短的 bcl-2 基因與 J6 以尾對(duì)頭結(jié)構(gòu)并列。異常的bcl-2基因表達(dá)失調(diào)可能在濾泡性B細(xì)胞淋巴瘤的生長(zhǎng)和分化紊亂中起關(guān)鍵作用。

一、細(xì)胞特性

1） 來(lái)源：43 歲白人男性  腹膜積液

2） 形態(tài)：淋巴母細(xì)胞，懸浮生長(zhǎng)

3） 含量：>1x10^6  細(xì)胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途：僅供科研使用。 

二、運(yùn)輸和保存 

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞 

（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。 

（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。 

三、培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備 

1）  準(zhǔn)備RPMI-1640（推薦WS-P-0001）培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；雙抗，1%。

血清我們推薦FBS500-WP-002

注：具體培養(yǎng)方式以隨貨說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)！！！！

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

四、傳代方法

收到細(xì)胞后，在倒置鏡下(最好是在4X物鏡)觀(guān)察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

（一)如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿(mǎn)，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。

(二)如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿(mǎn)，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣,鎂離子）洗1-2次。

2. 加0.7-1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，用力拍打瓶壁，期間每隔 5-10s放到顯微鏡下觀(guān)察，直至50-70%的細(xì)胞脫落后，加入2ml 以上完全培養(yǎng)基中止消化。

3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加完全培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒(méi)有特別說(shuō)明，收到細(xì)胞后的第一次傳代一般是一傳二。

注：

1、觀(guān)察細(xì)胞最好在低倍鏡（4或5X物鏡)下進(jìn)行，否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度?？醇?xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X或20X物鏡下。

2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請(qǐng)換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。

3、有些細(xì)胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶?jī)?nèi)。

4、收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)及時(shí)與我們聯(lián)系。