細胞名稱：MDA-MB-453 人乳腺癌細胞（含STR鑒定）

貨號：WS60008

規格：1×10?cells/T25培養瓶

一、細胞特性

1、 來源：乳腺；源自轉移灶：心包積液

2、 形態：上皮細胞樣，混合生長，貼壁與懸浮細胞同時存在。

3、培養基及培養凍存條件準備：

A.準備L15培養基；優質胎牛血清，10%；雙抗，1%。                       

血清推薦WinSera   FBS500-WP-002

B.培養條件：氣相：空氣，100%；該細胞培養不能通入CO2， 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。

 注意事項：

  a. 無CO2培養。如果沒有條件準備空氣氣相100%的培養箱的，可以采用不透氣密封蓋的T25培養瓶來培養，培養過程中每天將細胞拿出培養箱換1-2次空氣。

  b. 細胞形態是貼壁生長及懸浮生長混合，貼壁細胞形態是上皮樣（立方形或多邊形），但也有一些單個或成團的懸浮細胞。

  c. 細胞復蘇后一段時間內，貼壁不牢，大部分細胞呈懸浮狀態，懸浮細胞不要丟棄，換液或傳代時可以將懸浮細胞收集離心后，重新加入細胞培養瓶中，繼續培養。

C.凍存液：90%胎牛血清，10%DMSO 現用現配。

凍存液推薦WinSera  WS-1026-50ml/100ml

  儲存：液氮儲存

二、運輸和保存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

1.復蘇發貨  a.T25瓶活細胞發貨或 b.血清重懸發貨
2. 凍存管發貨(干冰發貨)  

A.1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。

B.T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

三、細胞接收后的處理

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態的依據。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的完全培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。