細胞名稱:C2C12 小鼠成肌細胞

貨號：WS20012（種屬鑒定）

規格：1×10?cells/T25培養瓶

細胞介紹

這株細胞是D. Yaffe和O. Saxel建立的小鼠成肌細胞株的亞克隆(由H. Blau等人構建)。C2C12細胞株可在低血清饑餓下分化，形成可伸縮的肌管并表達特征性的肌蛋白。如用骨形成蛋白2(BMP-2)處理后，分化途徑從成肌細胞轉換成成骨細胞。檢測表明鼠痘病毒（ectromelia virus，ECTV）陰性。該細胞復蘇后不耐受長時間運輸，郵寄后會有細胞脫落、壞死等現象，有條件請選用干冰冷鏈快遞或復蘇后上門自取。通過本庫誘導分化測試，在2%馬血清刺激下可誘導分化形成肌纖維。

一、細胞特性

1） 來源: 組織： 肌肉  品系：C3H

2） 形態：成肌細胞  貼壁生長

3） 含量：>1x10^6 細胞數

4） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途：僅供科研使用。 

二、運輸和保存 

干冰運輸及復蘇好存活細胞 

（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。 

（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。 

三、培養基及培養凍存條件準備 

1）準備DMEM（推薦WS-P-0002）培養基；優質胎牛血清，10%；雙抗，1%。        

備注：C2C12細胞生長較快，培養時細胞密度不可過高，否則容易分化,該細胞復蘇后不耐受長時間運輸，郵寄后會有細胞脫落、壞死等現象，有條件請選用干冰冷鏈快遞或復蘇后上門自取。收到郵寄活細胞的，收集上清離心后收集脫落的懸浮細胞和貼壁細胞一起建議T25培養瓶1：2傳代培養。參考傳代比例：根據細胞數量決定， 細胞密度應控制在 5000 – 15000 活細胞/平方厘米。傳代周期2-3天，隔天換液。

血清我們推薦FBS500-WP-002

注：具體培養方式以隨貨說明書為準！！！！

1）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。

2）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

四、傳代方法

收到細胞后，在倒置鏡下(最好是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。

（一)如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶，吸出培養液，換 10ml新鮮培養液后繼續培養。

(二)如果細胞已長滿，即可進行傳代培養。具體步驟如下：

1. 棄去培養液，用PBS（不含鈣,鎂離子）洗1-2次。

2. 加0.7-1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，用力拍打瓶壁，期間每隔 5-10s放到顯微鏡下觀察，直至50-70%的細胞脫落后，加入2ml 以上完全培養基中止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加完全培養基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養瓶中。如果沒有特別說明，收到細胞后的第一次傳代一般是一傳二。

注：

1、觀察細胞最好在低倍鏡（4或5X物鏡)下進行，否則不能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態請在10X或20X物鏡下。

2、瓶中運輸培養基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養基，細胞凍存后,培養基中可不加任何抗生素。

3、有些細胞貼壁不牢，如發現貼壁細胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶內。

4、收到細胞后，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請及時與我們聯系。