細胞名稱:266-6 小鼠胰腺腺泡癌細胞
貨號:WS20097(種屬鑒定)
規格:1×10?cells/T25培養瓶
細胞介紹
266-6是從患有胰腺腺泡細胞腫瘤的小鼠的胰腺中分離出的具有上皮形態的細胞系。用彈性蛋白酶 I/SV-40 T 抗原融合基因誘導腫瘤。細胞保留部分分化的表型,并表達可檢測水平的多種消化酶 mRNA。這些細胞對卡巴膽堿和縮膽囊素有反應,但對 P 物質、促胰液素或血管活性腸肽 (VIP) 沒有反應。它們帶有彈性蛋白酶 I/新霉素轉基因。
一、細胞特性
1) 來源: 小鼠 胰腺
2) 形態:上皮細胞樣 貼壁生長
3) 含量:>1x10^6 細胞數
4) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5) 用途:僅供科研使用。
二、運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。
(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
三、培養基及培養凍存條件準備
1)準備DMEM (推薦WS-P-0002)培養基;優質胎牛血清,10%;雙抗,1%。
推薦使用iCell-8280細胞包被工作液或者使用 0.1% 明膠包被的培養容器來培養該細胞。(ATCC-CRL-2151)。
血清我們推薦FBS500-WP-002
注:具體培養方式以隨貨說明書為準!!!!
1)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
2)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
四、傳代方法
收到細胞后,在倒置鏡下(最好是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。
(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶,吸出培養液,換 10ml新鮮培養液后繼續培養。
(二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養。具體步驟如下:
1. 棄去培養液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加0.7-1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,用力拍打瓶壁,期間每隔 5-10s放到顯微鏡下觀察,直至50-70%的細胞脫落后,加入2ml 以上完全培養基中止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加完全培養基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養瓶中。如果沒有特別說明,收到細胞后的第一次傳代一般是一傳二。
注:
1、觀察細胞最好在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,否則不能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態請在10X或20X物鏡下。
2、瓶中運輸培養基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養基,細胞凍存后,培養基中可不加任何抗生素。
3、有些細胞貼壁不牢,如發現貼壁細胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內。
4、收到細胞后,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請及時與我們聯系。