細胞名稱：AN3CA 人子宮內膜腺癌細胞

貨號：WS60024（STR鑒定）

規格：1×10?cells/T25培養瓶

一、細胞特性

細胞株源自一個未經治療的切除腫瘤碎塊。

1） 來源： AN3CA細胞建系于1964年。它衍生于子宮內膜癌患者淋巴結轉移組織，具有癌細胞的基本特性，能在體外長期傳代培養，在小鼠體內具有致瘤性。但細胞的生物學特性及超微結構尚未深入研究，僅發現該細胞系促黑激素合成為陰性。細胞常用于人子宮內膜癌細胞生物學及其相關特性研究。

2） 形態：白人 女 子宮組織

3） 含量：>1x106  細胞數

4） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5）用途：僅供科研使用。

二、運輸和保存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。

（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

三、培養基及培養凍存條件準備

1）準備DMEM培養基；優質胎牛血清， 87%；雙抗，1%。

 血清我們推薦FBS500-WP-002

注：AN3CA細胞生長密度高時有圓形細胞和不規則上皮樣細胞兩種形態，胞體上有黑色顆粒屬于正?，F象。

2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

四、 傳代方法

收到細胞后，在倒置鏡下(最好是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。

（一）如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶，吸出培養液，換 10ml新鮮培養液后繼續培養。

(二)如果細胞已長滿，即可進行傳代培養。具體步驟如下：

1. 棄去培養液，用PBS（不含鈣,鎂離子）洗1-2次。

2. 加0.7-1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，用力拍打瓶壁，期間每隔 5-10s放到顯微鏡下觀察，直至50-70%的細胞脫落后，加入2ml 以上完全培養基中止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加完全培養基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養瓶中。如果沒有特別說明，收到細胞后的第一次傳代一般是一傳二。

注：

1、觀察細胞最好在低倍鏡（4或5X物鏡)下進行，否則不能準確判斷細胞的傳代密度?？醇毎男螒B請在10X或20X物鏡下。

2、瓶中運輸培養基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養基，細胞凍存后,培養基中可不加任何抗生素。

3、有些細胞貼壁不牢，如發現貼壁細胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶內。

4、收到細胞后，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請及時與我們聯系。