細胞名稱:CHO倉鼠卵巢細胞
貨號:WS10001(種屬鑒定)
規格:1×10?cells/T25培養瓶
一、細胞特性
1957年從成年倉鼠的活組織切片中建立。
1) 來源:倉鼠卵巢
2) 形態:成纖維細胞樣,貼壁生長
3) 含量:>1x10^6 細胞數
4) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5) 用途:僅供科研使用。
二、運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。
(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
三、培養基及培養凍存條件準備
1)準備DMEM培養基(貨號WS-P-0002);優質胎牛血清,10%;雙抗,1%。
血清我們推薦FBS500-WP-002
注:具體培養方式以隨貨說明書為準!!!!
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
四、 傳代方法
收到細胞后,在倒置鏡下(最好是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。
(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶,吸出培養液,換 10ml新鮮培養液后繼續培養。
(二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養。具體步驟如下:
1. 棄去培養液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加0.7-1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,用力拍打瓶壁,期間每隔 5-10s放到顯微鏡下觀察,直至50-70%的細胞脫落后,加入2ml 以上完全培養基中止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加完全培養基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養瓶中。如果沒有特別說明,收到細胞后的第一次傳代一般是一傳二。
注:
1、觀察細胞最好在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,否則不能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態請在10X或20X物鏡下。
2、瓶中運輸培養基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養基,細胞凍存后,培養基中可不加任何抗生素。
3、有些細胞貼壁不牢,如發現貼壁細胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內。
4、收到細胞后,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請及時與我們聯系。