細胞名稱:MDA-MB-435s人黑色素瘤細胞/人乳腺癌細胞(含STR鑒定)
貨號:WS60007
規格:1×10?cells/T25培養瓶
一、細胞特性
1、 來源:黑素細胞,黑素瘤 以前認為是乳腺; 乳房; 導管; 導管癌; 胸腺滲出液
2、 形態:紡錘形 貼壁生長
3、培養基及培養凍存條件準備:
A.準備L15基礎培養基89%;優質胎牛血清10%; P/S青霉素-鏈霉素 1%;牛胰島素0.01mg/ml;谷胱甘肽(還原型) 0.01mg/ml
血清推薦WinSera FBS500-WP-002
B.培養條件:氣相:空氣,100%;該細胞培養不能通入CO2,如果沒有條件準備空氣氣相100%的培養箱的,可以采用不透氣密封蓋的T25培養瓶來培養,培養過程中每天將細胞拿出培養箱換1-2次空氣。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
C.凍存液:90%胎牛血清,10%DMSO 現用現配。
凍存液推薦WinSera WS-1026-50ml/100ml
儲存:液氮儲存
二、運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
1.復蘇發貨 a.T25瓶活細胞發貨或 b.血清重懸發貨
2. 凍存管發貨(干冰發貨)
A.1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。
B.T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
三、細胞接收后的處理
1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據。
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的完全培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。 收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶1:2傳代 。